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U-2OS人骨肉瘤細胞
種屬 | 人 |
年齡（性別） | 女 |
組織來源 | 骨；骨肉瘤 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
背景描述 | U-2 OS細胞(原名2T)是由Ponten·J和Saksela·E在1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。U-2 OS細胞與WI-38細胞共培養(yǎng)或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補體結(jié)合試驗(CF法)未檢測到病毒。U-2 OS細胞表達胰島素樣生長因子I、II(IGF-I、IGF-II)受體和骨肉瘤衍生生長因子(ODGF)。 |
生長培養(yǎng)基 | McCoy's 5A(貨號:PM150710)＋10% FBS(貨號:164210-500)＋1% P/S(貨號:PB180120) |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
懸浮細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室
2.擰松瓶蓋，細胞瓶豎立培養(yǎng)8h（或過夜）
3.待細胞沉底后吸除上層液體（含碎片殘渣，請小心操作），然后吸取沉底的細胞層（2ML左右轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶，加入新鮮的*培養(yǎng)基（如細胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%）繼續(xù)培養(yǎng)
U-2OS人骨肉瘤細胞
細胞處理方法：
一、貼壁細胞
1、 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基，到50ml離心管中，剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代，如沒有達到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細胞，對50ml上清進行離心收集細胞，如果細胞連片狀態(tài)，棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養(yǎng)。
二、懸浮細胞
1、接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5、1000rpm，5min 離心，用吸管小心吸出上清，加入培養(yǎng)基，重懸細胞。
6、將重懸好的細胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細胞）。
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