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U87MG 人腦星形膠質母細胞瘤
培養(yǎng)注意事項:
1、實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。
2、細胞操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內。
3、小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
3、工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。
| 目錄號 | CC-Y1528 |
| 細胞英文(簡稱) | U-87MG(U87MG) |
| 細胞名稱 | U-87MG(U87MG)人腦星形膠質母細胞瘤細胞 |
| 背景資料 | 收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快和我們聯(lián)系。如包裝完好，取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)是否正常，細胞的貼壁情況以及細胞密度,然后放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置2-3小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。 |
| 細胞來源 | ATCC |
| 代次 | P3 |
| 規(guī)格 | T25 |
| 細胞數 | 50-100萬 |
| 價格 | 電議 |
| 生物安全級別 | 2 |
| 組織來源 | 腦膠質 |
| 細胞形態(tài) | 貼壁 |
| 細胞活力 | 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion) |
| 細胞檢測 | 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
| 培養(yǎng)條件 | RPMI-1640 +10% FBS;37℃，5% CO2 |
| 傳代方法 | 建議1:2-1:3 兩天換液一次 |
| 凍存條件 | *培養(yǎng)基50%+40%FBS+10%DMSO |
U87MG 人腦星形膠質母細胞瘤
細胞處理方法：
一、貼壁細胞
1、 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基，到50ml離心管中，剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代，如沒有達到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細胞，對50ml上清進行離心收集細胞，如果細胞連片狀態(tài)，棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養(yǎng)。
二、懸浮細胞
1、接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5、1000rpm，5min 離心，用吸管小心吸出上清，加入培養(yǎng)基，重懸細胞。
6、將重懸好的細胞轉入六孔板或者細胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細胞）。
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